Polümeraasi ahelreaktsioon, lühendatultPCRinglise keeles on molekulaarbioloogia tehnika, mida kasutatakse spetsiifiliste DNA fragmentide amplifitseerimiseks.Seda võib pidada spetsiaalseks DNA replikatsiooniks väljaspool keha, mis võib oluliselt suurendada väga väikest DNA kogust.Kogu aja jooksulPCRreaktsiooniprotsessis mängib ülitähtsat rolli üks ainete klass – ensüümid.
1. Taq DNA
Esimestel päevadel tehtud katsetesPCR, teadlased kasutasid Escherichia coli DNA polümeraasi I, Kuid selle ensüümiga on probleem: see peab iga tsükli sooritamisel uue ensüümi täiendama, mis muudab operatsioonietapid veidi keeruliseks ja seda on raske täielikult automaatselt amplifitseerida.See probleem lahendati pärast seda, kui teadlased eraldasid 1988. aastal kogemata Thermus aquaticusest Taq DNA polümeraasi. Sellest ajast alates on DNA automaatne amplifitseerimine muutunud reaalsuseks.Selle ensüümi avastamine teeb kaPCRtehnoloogia on mugav, praktiline ja universaalne tehnoloogia.Praegu on Taq DNA polümeraas DNA komplektides kõige levinum polümeraas.
2. PfuDNA
Nagu eespool mainitud, on Taq DNase'is suur viga, mistõttu on teadlased Taq DNA polümeraasi teatud määral modifitseerinud, et vältida mittespetsiifilist amplifikatsiooni mittevastavuse tõttu, mille tulemuseks on ebatäpsed testitulemused.Kuid Taq DNA polümeraasi modifitseerimine võib pärssida DNA polümeraasi aktiivsust toatemperatuuril.PfuDNA polümeraas võib hästi korvata Taq DNA polümeraasi ülaltoodud puudused, nii et PCR reaktsiooni saab läbi viia normaalselt ja sihtgeeni amplifikatsiooni edukust saab tõhusalt parandada.
3. Pöördtranskriptaas
Pöördtranskriptaas avastati 1970. aastal. See ensüüm kasutab matriitsina RNA-d, substraadina dNTP-d, järgib aluste sidumise põhimõtet ja sünteesib RNA matriitsiga komplementaarse DNA üheahelalise ahela 5'-3' suunas.Pöördtranskriptaas sõltub peamiselt DNA või RNA matriitsi DNA polümeraasi aktiivsusest ja seetõttu puudub sellel 3'-5' eksonukleaasi aktiivsus.Sellel on aga RNaasi H aktiivsus, mis piirab teatud määral pöördtranskriptaasi sünteesi pikkust.Metsiku pöördtranskriptaasi madala täpsuse ja termostabiilsuse tõttu muutsid teadlased seda ka.
SestPCRkatsetes on peamised kulumaterjalid: individuaalne PCR-tuub, 4/8-ribaga PCR-tuub, PCR-plaadid.
Labio omaPCR tarbekaubadomama järgmisteeliseid:
PCR plaadid: Lai termotsükleri ühilduvus;Kõrge kontrastsusega, hõlpsasti tuvastatav;hästi fluorestsents peegeldus;heasoojusülekanne;Sertifitseeritud DNaasi, RNaasi, DNA, PCR inhibiitorid ja testitud pürogeenivaba.
Üksikud PCR-tuubid: Aurustumiskindel; heasoojusülekanne;suurepärane optiline selgus; Sertifitseeritud DNaasi, RNaasi, DNA, PCR inhibiitorid ja testitud pürogeenivabad.
4/8-ribalised PCR-tuubid: Üliõhukesed seinad; suur selgus; hea fluorestsentsi peegeldus;saab kasutada farmaatsiatööstuses, toiduainetööstuses ja molekulaarbioloogias; kõrgekvaliteediline esmane PP materjal; sertifitseeritud DNaasi, RNaasi, DNA, PCR inhibiitorid ja testitud pürogeenivaba.
Postitusaeg: juuni-09-2023